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第一部分 创新实验1

创新实验1人工金属核酸酶——邻菲罗啉铜配合物的合成及其与DNA作用1

一、知识背景1

二、实验目的4

三、实验原理5

四、仪器与材料9

五、实验方法与步骤10

六、数据处理11

七、结果与讨论11

八、注意事项12

九、思考题12

十、实验延伸12

十一、参考文献13

创新实验2金属β-内酰胺酶L1的表达及动力学表征13

一、知识背景13

二、实验目的15

三、实验原理15

四、仪器与材料18

五、实验方法与步骤19

六、数据处理21

七、结果与讨论21

八、注意事项22

九、思考题22

十、实验延伸23

十一、参考文献23

创新实验3大肠杆菌表达重组人粒细胞-集落刺激因子包涵体的PFLC复性与纯化25

一、知识背景25

二、实验目的28

三、实验原理28

四、仪器与材料30

五、实验方法与步骤30

六、数据处理32

七、结果与讨论32

八、注意事项33

九、思考题33

十、实验延伸33

十一、参考文献34

创新实验4多维色谱与MALDI-TOF-MS联用技术对人血清中低丰度蛋白的分离与鉴定34

一、知识背景34

二、实验目的38

三、实验原理38

四、仪器与材料40

五、实验方法与步骤40

六、数据处理41

七、结果与讨论41

八、注意事项41

九、思考题42

十、实验延伸42

十一、参考文献42

创新实验5罗丹明基“OFF-ON”型荧光探针对金属离子的识别特性及其生物学应用43

一、知识背景43

二、实验目的45

三、实验原理46

四、仪器与材料48

五、实验方法与步骤49

六、数据处理50

七、结果与讨论50

八、注意事项51

九、思考题51

十、实验延伸51

十一、参考文献51

创新实验6表面等离子共振技术测定叶酸与叶酸受体蛋白结合常数52

一、知识背景52

二、实验目的53

三、实验原理54

四、仪器与材料55

五、实验方法与步骤56

六、数据处理58

七、结果与讨论58

八、注意事项58

九、思考题58

十、实验延伸59

十一、参考文献59

创新实验7生物细胞膜的分离及其重要成分的分析64

一、知识背景64

二、实验目的66

三、实验原理67

四、仪器与材料69

五、实验方法与步骤70

六、数据处理73

七、结果与讨论73

八、注意事项74

九、实验延伸74

十、思考题74

十一、参考文献74

第二部分 化学生物学基础操作实验75

基础操作实验1加样器的正确使用和校正75

一、实验目的75

二、实验原理75

三、仪器与试剂75

四、实验方法与步骤75

基础操作实验2无菌操作的消毒灭菌与培养76

一、实验目的76

二、实验原理77

三、仪器与材料77

四、实验方法与步骤78

五、结果与讨论78

六、注意事项78

七、思考题78

基础操作实验3琼脂糖凝胶电泳检测DNA79

一、实验目的79

二、实验原理79

三、仪器与试剂81

四、实验方法与步骤81

五、结果与讨论81

六、注意事项81

七、思考题82

基础操作实验4大肠杆菌感受态细胞制备与质粒DNA的转化82

一、实验目的82

二、实验原理82

三、仪器与材料83

四、实验方法与步骤83

五、结果与讨论84

六、注意事项84

七、思考题84

基础操作实验5核酸的分离及其定量分析84

一、实验目的84

二、实验原理85

三、仪器与材料86

四、实验方法与步骤87

五、结果与讨论87

六、注意事项88

七、思考题88

基础操作实验6 Bradford法测定蛋白质含量88

一、实验目的88

二、实验原理88

三、仪器与材料89

四、实验方法与步骤89

五、结果与讨论90

六、注意事项90

七、思考题90

基础操作实验7高效液相色谱柱的装填与测试91

一、实验目的91

二、实验原理91

三、仪器与材料91

四、实验方法与步骤92

五、结果与讨论92

六、注意事项92

七、思考题92

基础操作实验8高效反相液相色谱过程热力学函数的测定93

一、实验目的93

二、实验原理93

三、仪器与材料94

四、实验方法与步骤94

五、结果与讨论94

六、注意事项95

七、思考题95

基础操作实验9体积排阻色谱法分离标准蛋白95

一、实验目的95

二、实验原理96

三、仪器与材料96

四、实验方法与步骤97

五、结果与讨论97

六、注意事项97

七、思考题97

基础操作实验10 MTT法检测秋水仙碱的细胞毒性98

一、实验目的98

二、实验原理98

三、仪器与材料99

四、实验方法与步骤99

五、结果与讨论100

六、注意事项100

七、思考题100

第三部分 化学生物学综合实验101

综合实验1质粒DNA微量制备与鉴定101

一、实验目的101

二、实验原理101

三、仪器与材料103

四、实验方法与步骤104

五、结果与讨论105

六、注意事项105

七、思考题105

综合实验2外源基因体外扩增、质粒构建及其分析105

一、实验目的105

二、实验原理105

三、仪器与材料107

四、实验方法与步骤108

五、结果与讨论109

六、注意事项109

七、思考题110

综合实验3 SDS-PAGE及其蛋白质相对分子质量测定110

一、实验目的110

二、实验原理110

三、仪器与材料113

四、实验方法与步骤114

五、结果与讨论116

六、注意事项116

七、思考题116

综合实验4蛋白质的变性、凝固及其沉淀反应117

一、实验目的117

二、实验原理117

三、仪器与材料119

四、实验方法与步骤120

五、结果与讨论120

六、注意事项121

七、思考题121

综合实验5钙调蛋白的分离纯化121

一、实验目的121

二、实验原理121

三、仪器与材料122

四、实验方法与步骤123

五、结果与讨论123

六、注意事项124

七、思考题124

综合实验6一种天然无序蛋白质的表达、纯化及其构象变化124

一、实验目的124

二、实验原理125

三、仪器与材料126

四、实验方法与步骤127

五、结果与讨论127

六、注意事项128

七、思考题128

综合实验7弱阳离子交换蛋白折叠液相色谱法复性还原变性溶菌酶128

一、实验目的128

二、实验原理129

三、仪器与材料131

四、实验方法与步骤131

五、结果与讨论132

六、注意事项132

七、思考题132

综合实验8基于神经氨酸酶受体的分子对接133

一、实验目的133

二、实验原理133

三、实验软件程序134

四、实验方法与步骤134

五、结果与讨论135

六、思考题135

综合实验9纳豆激酶及蚓激酶催化纤维蛋白降解反应的动力学135

一、实验目的135

二、实验原理136

三、仪器与材料136

四、实验方法与步骤136

五、结果与讨论136

六、注意事项137

七、思考题137

综合实验10功能切换型的防生物污染的表/界面构建137

一、实验目的137

二、实验原理138

三、仪器与材料138

四、实验方法与步骤139

五、结果与讨论140

六、注意事项140

七、思考题140

综合实验11药物作用后肿瘤细胞膜超微结构的原子力显微镜法141

一、实验目的141

二、实验原理141

三、仪器与材料142

四、实验方法与步骤142

五、结果与讨论142

六、注意事项143

七、思考题143

综合实验12荧光素类焦磷酸根离子荧光探针的制备及荧光性质143

一、实验目的143

二、实验原理143

三、仪器与材料144

四、实验方法与步骤144

五、结果与讨论145

六、注意事项145

七、思考题145

综合实验13 2，7-二氯荧光素的合成145

一、实验目的145

二、实验原理145

三、仪器与材料146

四、实验方法与步骤146

五、结果与讨论147

六、注意事项147

七、思考题147

综合实验14新型香豆素类荧光探针的合成与性能147

一、实验目的147

二、实验原理148

三、仪器与材料148

四、实验方法与步骤148

五、结果与讨论149

六、思考题149

附录150

附录一 化学生物学实验须知150

附录二 实验记录及实验报告的书写152

附录三 常用器皿的洗涤与处理153

附录四 缩写、符号、换算系数和数据155

附录五 重要分子的物理常数及性质160