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目 录1

第1章酶法分析1

1.1酶及酶催化反应1

1.1.1酶活性的概念2

1.1.2酶催化反应的类型及酶的编号2

1.1.3酶催化反应的特性5

1.1.4酶催化反应的动力学6

1.1.5影响酶催化反应的因素13

1.2酶法分析的检测技术16

1.2.1酶活性的测定17

1.2.2底物的测定18

1.2.3抑制剂及活化剂的测定19

1.2.4酶的检测方法20

1.3酶固定化技术与酶传感器22

1.3.1酶固定化方法22

1.3.2酶电极25

1.3.3流动系统中的固定化酶32

1.3.4固定化酶在分析流动系统中的应用33

1.4.1细胞内酶活性的测定38

1.4酶活性测定的应用38

1.4.2工业过程及产品中酶的测定40

1.4.3酶在生化分析中应用的发展趋势45

参考文献47

第2章蛋白质分析48

2.1蛋白质的分类及结构48

2.1.1蛋白质的基本组成单位——氨基酸的结构48

2.1.2多肽的结构48

2.1.3蛋白质的分类50

2.2蛋白质分析的意义56

2.3蛋白质分析方法57

2.3.1光谱法58

2.3.2化学方法60

2.3.3染料结合法63

2.3.4分离及生物分析法67

参考文献68

第3章免疫分析69

3.1抗原、抗体及其反应71

3.1.1抗原71

3.1.2抗体76

3.1.3抗原与抗体的反应92

3.2免疫分析中的分离方法96

3.2.1免疫分析对分离技术的要求97

3.2.2分离方法的分类97

3.2.3免疫学分离系统98

3.3免疫分析方法的建立及其优化102

3.3.1免疫分析中的抗体位点占据原理102

3.3.2分析条件的优化106

3.3.3免疫分析方法的分类109

3.4酶免疫分析（Enzyme Immunoassy）112

3.4.1酶标记试剂114

3.4.2游离标记物和与抗体结合的标记物的分离116

3.4.3固定相的选择116

3.4.4影响酶免疫分析的因素117

3.4.5酶免疫分析应用举例（酶免疫分析试纸用于吗啡的分析）119

3.5荧光免疫分析122

3.5.1荧光标记物122

3.5.2生物体液中荧光测定的局限性124

3.5.4均相荧光免疫分析125

3.5.3荧光免疫分析的仪器125

3.5.5非均相荧光免疫分析129

3.6免疫分析在毒物学方面的应用135

3.6.1方法及技术135

3.6.2分析毒物学方面的应用136

3.7免疫分析发展的趋势139

3.7.1基因工程抗体139

3.7.2生物素－亲和素（Biotin-(Streptavidin)Avidin Couple，简称ABC）体系的多重标记141

3.7.3 自动化和实用的免疫分析法142

参考文献144

3.7.4基于温敏水凝胶的相分离免疫分析144

第4章核酸分析146

4.1脱氧核糖核酸及核糖核酸的结构146

4.1.1碱基、核苷及核苷酸147

4.1.2 DNA的结构148

4.1.3 RNA的结构151

4.2核酸的定量及结构分析152

4.2.1免疫化学法152

4.2.2色谱及电泳法156

4.2.3光谱法156

4.3 小分子与核酸相互作用的研究164

4.3.1小分子与核酸的相互作用模式165

4.3.2小分子药物与核酸的相互作用170

4.3.3核酸小分子探针的研究172

4.4 DNA序列的测定176

4.4.1人类基因组项目（Human Genome Project）177

4.4.2特异性化学裂解法快速测定DNA序列177

4.4.3 Sanger链终止DNA测序法181

4.4.4高效毛细管凝胶电泳及超薄板凝胶电泳法182

4.4.5非凝胶DNA测序研究进展184

4.5.2基因诊断的原理、意义187

4.5核酸分子杂交分析与基因诊断187

4.5.1核酸分子杂交的概念及原理187

4.5.3基因诊断的途径189

4.5.4基因探针（包括放射性及非放射性同位素标记法）190

4.5.5探针的标记197

4.5.6基因诊断的实验技术和方法203

参考文献210

第5章氨基酸分析211

5.1氨基酸的基本结构及性质211

5.1.2氨基酸的异构化213

5.1.1氨基酸的分类213

5.1.3氨基酸的离子特性214

5.1.4氨基酸在生物体内的转化217

5.1.5肽218

5.2氨基酸的定量斑点分析220

5.2.1斑点显色分析法220

5.2.2斑点荧光分析法220

5.3色谱方法221

5.3.1离子交换色谱法221

5.3.2反相色谱分析法224

5.3.3气相色谱法（GC）226

5.3.4氨基酸的电泳分析法227

5.4基于氨基酸选择性反应的分析方法228

5.4.1显色分析法228

5.4.2荧光方法228

5.4.3微生物方法228

5.4.4酶分析法229

5.5氨基酸分析中存在的问题及发展趋势230

参考文献231

6.1糖的结构232

第6章糖的分析232

6.2糖的化学分析法233

6.2.1羰基的反应234

6.2.2多糖的结构分析235

6.3糖的酶法分析239

6.3.1基于葡萄糖氧化酶的葡萄糖分析239

6.3.2基于葡萄糖脱氢酶或己糖激酶的葡萄糖分析法241

6.3.3其它己糖分析方法242

6.4.1纸色谱及薄层色谱法243

6.4糖混合物的分离鉴定243

6.4.2气相色谱法244

6.4.3高效液相色谱法（HPLC）246

6.4.4高效毛细管电泳法（HPCE）246

参考文献247

第7章 生物大分子分离纯化技术248

7.1生物样品的常规分离纯化方法248

7.1.1透析248

7.1.2微过滤250

7.1.3盐析法251

7.1.4冷冻干燥252

7.1.5离心253

7.2生化分析样品的准备与预处理257

7.2.1样品的类型、采集及保存257

7.2.2酶样品的准备260

7.3电泳法264

7.3.1基本原理264

7.3.2影响电泳分离的因素265

7.3.3聚丙烯酰胺凝胶电泳266

7.3.4琼脂糖凝胶电泳272

7.3.5高效毛细管电泳276

7.4液相色谱法287

7.4.1排阻色谱288

7.4.2亲和层析293

7.4.3离子交换色谱296

7.4.4反相及疏水作用色谱法298

7.4.5液－液分配色谱298

7.4.6场流分级分离法299

7.4.7灌注层析法299

参考文献302