图书介绍
基因工程实验 Annexin V-EGFP 重组蛋白质的克隆表达与检测PDF|Epub|txt|kindle电子书版本网盘下载
- 殷武主编 著
- 出版社： 北京：科学出版社
- ISBN：9787030378040
- 出版时间：2013
- 标注页数：99页
- 文件大小：38MB
- 文件页数：113页
- 主题词：基因工程－实验－高等学校－教材
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基因工程实验 Annexin V-EGFP 重组蛋白质的克隆表达与检测PDF格式电子书版下载
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图书目录
第一章Annexin V -EGFP基因克隆与表达载体构建3
实验1 Annexin V表达序列检索3
1.实验目的3
2.实验原理3
3.实验方法与结果4
实验2 Annexin V -EGFP基因克隆设计8
1.实验目的8
2.实验原理8
3.实验方法16
实验3哺乳动物细胞中提取RNA17
1.实验目的17
2.实验原理（异硫氰酸胍酚氯仿一步法）17
3.实验仪器与器材17
4.试剂与配制18
5.实验步骤18
6.实验结果分析与讨论20
7.思考题21
实验4逆转录PCR与产物鉴定22
1.实验目的22
2.实验原理22
3.实验方法22
4.实验步骤26
5.实验结果与讨论26
实验5 PCR产物的酶切与克隆29
1.实验目的29
2.实验原理29
3.实验仪器与器材30
4.试剂与配制30
5.实验步骤30
实验6克隆鉴定38
1.实验目的38
2.实验原理38
3.实验仪器与器材39
4.试剂与配制39
5.实验步骤39
实验7大肠杆菌感受态的制备40
1.实验目的与要求40
2.实验原理40
3.实验仪器与器材40
4.试剂与配制40
5.实验步骤40
参考文献41
第二章Annexin V -EGFP质粒的扩增与提取45
实验8 Annexin V -EGFP质粒的扩增45
1.实验目的45
2.实验仪器与器材45
3.试剂与配制45
4.实验原理45
5.实验步骤45
实验9 Annexin V-EGFP质粒的提取47
1.实验目的47
2.实验原理与方法47
3.实验仪器与器材48
4.试剂与配制48
5.实验步骤48
6.质粒提取常见问题49
参考文献55
第三章Annexin V -EGFP基因的表达与纯化59
实验10 Annexin V -EGFP基因的表达59
1.实验目的60
2.实验原理60
3.实验仪器与器材61
4.试剂与配制61
5.实验步骤61
6.注意事项62
7.讨论62
8.思考题62
实验11 Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白His6-EGFP-AnnexinV63
1.实验目的63
2.实验原理64
3.实验仪器与器材65
4.试剂与配制65
5.实验方法65
6.注意事项66
7.讨论66
8.思考题66
参考文献66
第四章Annexin V -EGFP重组蛋白质的应用检测71
实验12 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质71
1.实验目的71
2.实验原理71
3.实验仪器与器材73
4.试剂与配制73
5.实验方法74
6.注意事项75
7.讨论76
8.思考题76
实验13蛋白质转移印迹法检测Annexin V -EGFP基因表达77
1.实验目的77
2.实验原理77
3.实验试剂78
4.实验仪器79
5.实验步骤79
6.注意事项81
7.讨论81
8.思考题82
实验14流式细胞仪检测凋亡细胞83
1.实验目的83
2.实验原理83
3.实验试剂85
4.实验仪器86
5.实验步骤86
6.注意事项87
7.扩展87
8.思考题88
实验15荧光显微镜检测89
1.实验目的89
2.实验原理89
3.实验试剂90
4.实验仪器90
5.实验步骤90
6.注意事项91
7.扩展92
8.思考题92
参考文献92
附录94
1.氨基酸密码子表94
2.酶切位点保护碱基表94
3.SDS-PAGE分离胶配方表97
4.SDS-PAGE浓缩胶配方表98
5.网络资源99