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第一章 生物化学技术实训操守与基本技能1

第一节 生物化学技术实训操守1

一、生物化学技术实训工作“六环节”的训练操守1

二、生物化学技术实训室规则和安全常识6

第二节 生物化学技术基本技能6

一、常用玻璃仪器的洗涤6

二、常用清洗液的清洗原理与配制7

三、特殊清洗液的清洗原理与使用浓度8

四、吸量管的种类和使用9

五、取液器的种类和使用11

六、溶液的混匀13

七、过滤15

八、低速台式离心机的使用15

复习思考题16

第二章 膜分离技术18

第一节 膜分离基本技术18

一、透析21

二、超滤22

三、微滤23

四、电渗析23

五、反渗透24

六、纳米过滤25

复习思考题26

第二节 实训项目26

实训2-1 蛋白质的透析脱盐与超滤浓缩、脱盐26

实训2-2 超滤技术分离香菇多糖34

第三章 层析分离技术39

第一节 层析分离基本技术39

一、分离原理40

二、层析技术的分类40

三、吸附层析41

四、分配层析43

五、凝胶层析43

六、离子交换层析46

七、亲和层析47

八、高效液相层析49

复习思考题52

第二节 实训项目53

实训3-1 纸层析法分离鉴定氨基酸53

实训3-2 糖的薄层层析58

实训3-3 茶多酚的聚酰胺薄膜层析法63

实训3-4 蛋白质溶液的凝胶过滤脱盐68

实训3-5 离子交换层析法分离氨基酸混合液75

实训3-6 胰蛋白酶的亲和层析分离纯化80

第四章 生物化学中常用的化学检测技术86

第一节 生物化学中的化学检测基本技术86

一、重量法87

二、化学法88

复习思考题91

第二节 实训项目92

实训4-1 总氮量测定法测定蛋白质的含量——改良微量凯氏定氮法92

实训4-2 总氮量测定法测定蛋白质的含量——半自动凯氏定氮法99

实训4-3 抗坏血酸（维生素C）含量的测定104

实训4-4 还原糖和总糖的测定108

第五章 电泳分离技术113

第一节 电泳分离基本技术113

一、电泳的基本原理114

二、区带电泳115

三、几种电泳新技术118

复习思考题122

第二节 实训项目122

实训5-1 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳122

实训5-2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量130

实训5-3 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点137

实训5-4 DNA琼脂糖凝胶电泳141

实训5-5 DNA的膜转移电泳（Southern印迹转移法）147

实训5-6 蛋白质的膜转移电泳（免疫印迹转移法）153

第六章 分光光度检测技术161

第一节 分光光度检测基本技术161

一、各种分光光度技术简介161

二、待测物质的定性分析163

三、待测物质的定量分析164

四、分光光度计的结构原理166

五、分光光度检测技术的实际应用168

复习思考题171

第二节 实训项目171

实训6-1 福林-酚试剂法测定蛋白质含量171

实训6-2 紫外吸收法测定蛋白质含量177

实训6-3 Bradford法测定蛋白质含量181

实训6-4 淀粉酶活性的测定185

第七章 生物大分子提取与离心、沉淀技术191

第一节 生物大分子提取与分离技术191

一、细胞破碎技术192

二、生物大分子提取技术196

三、离心分离技术198

四、沉淀分离技术203

复习思考题208

第二节 实训项目209

实训7-1 大肠杆菌细胞的超声波细胞破碎209

实训7-2 大蒜中SOD的分离提取与测活211

实训7-3 DNA的提取217

实训7-4 RNA的提取222

附录227

附录一 实验用水的制备227

附录二 常用化学试剂的规格、保存、配制及取用232

附录三 缓冲溶液的配制方法与使用和保存235

附录四 常用的离子交换剂245

附录五 常用的凝胶过滤介质249

附录六 常用的亲和层析基质250

附录七 透析袋、微孔滤膜和超滤膜257

附录八 氨基酸及蛋白质的一些物理常数259

附录九 离心机转速与相对离心力换算列线图261

附录十 实验室常用的干燥剂262

附录十一 实训室常用的生化设备的使用266

参考文献278