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一、层析技术简介1

二、层析技术分类4

1．两相物质在层析全过程中所处的生物物理状态4

2．层析表现形式4

3．层析载体内容5

4．技术形式及理化性质5

三、层析技术应用10

（一）凝胶层析技术10

1．免疫球蛋白G（IgG）的纯化与制备15

2．肌红蛋白的纯化与制备19

3．酶标记体（IgG）的纯化与制备22

戊二醛标记二步法与检测23

过碘酸氧化法与检测26

4．IgM类MoAb的纯化与制备28

Sephadex凝胶层析技术28

Sepharose凝胶层析技术30

5．蓖麻毒蛋白-A链的纯化与制备32

6．细胞色素-C的纯化与制备34

7．胰岛素的纯化与制备36

8．分泌型IgA的分离与制备37

9．核酸（RNA）的纯化39

10．胶体金标记单克隆抗体的纯化40

11．蛋白质分子量测定43

（二）离子交换树脂层析技术46

1．硫胺素（维生素B1）的提取48

2．核黄素的分离与提取51

3．碱性氨基酸的分离53

4．核苷酸的分离55

5．单核苷酸的分离57

6．肽的制备性分离61

7．食物中胡萝卜素的分离与测定65

8．胆红素的分离与测定69

（三）离子交换纤维素层析技术73

1．蛇毒磷酯酶-A2的纯化79

2．碱性磷酸酯酶的纯化83

3．钩体属特异抗原的纯化88

4．鸡卵类粘蛋白的纯化91

5．免疫球蛋白M-Fc（IgM-Fc）重链的纯化94

6．补体C3抗血清的纯化97

7．血红蛋白肽链的纯化102

8．干扰素的纯化105

（四）离子交换-交联葡聚糖层析技术108

1．输卵管AKP的纯化110

2．乙型肝炎“e”抗体的纯化113

3．羧肽酶-Y的纯化116

4．鸽血清、组织AKP的纯化120

5．IgG链、片段的纯化121

6．IgE的分离与纯化123

（五）亲和层析技术125

1．胰蛋白酶的分离与纯化126

2．蛇毒磷酯酶-A2的分离与纯化131

3．葡萄球菌蛋白-A分离与纯化134

4．人与哺乳动物的IgG亚类的分离与纯化138

5．抗IgG抗体的分离与纯化141

6．旋毛虫蚴虫α-杆细胞颗粒可溶性组份进一步分离与纯化144

（六）纸层析技术148

1．氨基酸的层析与检测156

2．His的层析与检测159

3．Arg的层析与检测160

4．Pro与bydroxy-Pro的层析与检测160

5．Trp的层析与检测161

6．Tyr的层析与检测162

7．Gly的层析与检测162

8．Val、Gly、Leu共存时的层析与检测162

9．微量蛋白质、肽或氨基酸的层析与检测163

10．多种金属离子的层析与检测164

11．Cu2SO 4、CuCl2和CuNO3的层析与检测165

12．Mg2+、K+、Na+的层析与检测166

13．糖类的层析与检测166

14．糖果色素的层析与检测168

（七）薄层层析技术170

1．菌体细胞壁含糖物质的分离分析171

2．混合性糖的分离与检测175

3．食用色素的分离与检测180

4．食物中黄曲霉毒素B1的分离与检测184

5．3·4-苯并芘的分离与检测187

6．亚硝胺类化合物的分离与检测189

7．生物碱的分离与检测192

8．雷公藤碱的分离与检测193

9．苦楝素的分离与检测194

10．矿物油的分离与检测195

11．有机磷农药的分离与检测195

12．有机氯农药的分离与检测199

13．核苷酸的分离与分析203

14．细胞膜磷酯的分离与分析205

15．寡核苷酸的同系层析与分离210

（八）聚酰胺薄膜层析技术215

1．丹磺酰氯-氨基酸层析与鉴定217

2．DNS-氨基酸膜板层析与鉴定221

3．蛋白质N-末端层析与鉴定224

4．DNP-氨基酸层析与鉴定228

5．肽链顺序层析与鉴定232

附录238

1．装填Sephadex、Bio及Sepharose column，流速受到影响的原因及处理办法238

2．影响分辨率的因素及解决办法239

3．国内外各种层析载体、商品种类、物理特性、吸附剂及显色反应240

4．各种氨基酸中、英文缩写及理化性质265

5．常用冷却剂和干燥剂268

主要参考文献270