图书介绍
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- 吕士杰主审;张巍主编;李妍,徐俊杰副主编;王程,朱文赫,刘玉莲,纪朋艳,芦晓晶,李妍,李庆华,杨宇丹,张巍,张向阳,罗军,罗洪斌,柳明珠,姜艳霞,徐世明,徐俊杰编者 著
- 出版社: 北京:人民卫生出版社
- ISBN:9787117185493
- 出版时间:2014
- 标注页数:152页
- 文件大小:36MB
- 文件页数:161页
- 主题词:生物化学-实验-医学院校-教学参考资料;分子生物学-实验-医学院校-教学参考资料
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图书目录
第一篇 生物化学与分子生物学实验基本知识2
第一章 生物化学与分子生物学实验室规则与基本要求2
一、实验室规则2
二、实验记录及实验报告的书写3
三、实验误差的产生及提高实验准确度的方法4
第二章 生物化学与分子生物学实验基本操作8
一、玻璃器皿的洗涤与清洁8
二、常用玻璃仪器的使用9
三、移液器的选择与使用11
四、安全注意事项及意外事故的处理12
第二篇 生物化学与分子生物学基本实验技术及原理14
第三章 分光光度技术14
一、基本原理14
二、技术分类16
三、仪器基本构造16
四、常用分光光度计及使用方法17
第四章 电泳技术20
一、基本原理20
二、常用电泳技术21
三、电泳的影响因素23
四、电泳可能遇到的问题及解决办法24
第五章 层析技术26
一、基本原理26
二、层析分类27
三、柱层析的基本过程31
第六章 离心分离技术32
一、基本原理32
二、离心机的主要构造和类型33
三、离心方法35
四、离心操作的注意事项37
第七章 生物大分子制备技术38
一、生物材料的选择39
二、组织细胞破碎与细胞器分离40
三、生物大分子的提取41
四、生物大分子的分离纯化42
五、提纯后的处理49
第八章 核酸分子杂交51
一、基本原理51
二、探针51
三、杂交滤膜52
四、杂交条件52
五、常见分子杂交的种类53
第九章 重组DNA技术54
一、目的DNA片段的取得54
二、DNA片段和载体的连接54
三、导入宿主细胞55
四、筛选55
五、基因表达55
第十章 聚合酶链反应(PCR)57
一、基本原理57
二、基本步骤57
三、几种重要的PCR衍生技术57
四、影响因素58
第十一章 细胞培养技术61
一、细胞培养的基本设备及准备工作61
二、细胞培养用液及培养基(液)65
三、细胞培养的基本技术68
第三篇 生物化学与分子生物学实验72
第十二章 理论验证实验72
实验一 蛋白质含量测定72
一、双缩脲法测定蛋白质浓度72
二、Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度73
三、紫外分光光度法测定蛋白质浓度74
四、考马斯(Comessie)亮蓝结合法测定蛋白质浓度75
五、BCA法测定蛋白质浓度76
实验二 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳77
实验三 维生素C含量测定79
一、总维生素C含量测定——2,4-二硝基苯肼法79
二、还原型维生素C含量测定81
实验四 脲酶Km值简易测定82
实验五 激素对血糖浓度的影响84
实验六 血清谷丙转氨酶(ALT)活性测定(赖氏法)87
实验七 血清总胆固醇的测定88
一、硫磷铁法88
二、血清总胆固醇的测定(邻苯二甲醛法)90
三、血清胆固醇的定量测定(醋酸酐法)91
实验八 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳92
实验九 SDS-PAGE测定蛋白质的分子量93
实验十 DNA琼脂糖凝胶电泳96
实验十一 聚合酶链反应(PCR)体外扩增DNA98
实验十二 质粒DNA的提取、制备与检测101
第十三章 综合分析实验104
实验一 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化104
实验二 血清清蛋白的分离、提纯和定量106
实验三 组织DNA与RNA的分离、提纯和定量109
实验四 血清高密度脂蛋白中胆固醇的测定112
实验五 细胞基因组DNA的提取与检测114
一、细胞基因组DNA的提取114
二、提取DNA鉴定115
三、DNA分子量大小鉴定116
实验六 反转录聚合酶链反应(RT-PCR)116
实验七 DNA的限制性酶切与琼脂糖凝胶电泳119
实验八 DNA重组实验121
实验九 重组克隆的筛选124
实验十 蛋白质免疫印迹分析(Western blot)126
实验十一 Southern印迹杂交130
实验十二 Northern印迹杂交133
第十四章 创新性实验137
实验一 蛋白质或酶的分离纯化137
实验二 饥饿和饱食对肝糖原含量的影响137
实验三 乙型肝炎病毒DNA的检测138
实验四 血清(浆)过氧化脂质测定138
实验五 血友病的分子诊断139
实验六 RNA干扰技术靶向沉默目的基因140
第十五章 设计性实验141
实验一 组织蛋白的提取及含量测定141
实验二 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定142
实验三 蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定143
设计方案Ⅰ 蛋白质的表达、分离、纯化144
设计方案Ⅱ 蛋白质的鉴定145
实验四 比较不同组织中DNA的含量和纯度147
实验五 蛋白质的两性反应和等电点测定147
实验六 血清中胆固醇及甘油三酯的测定148
设计方案Ⅰ 血清甘油三酯简易测定法148
设计方案Ⅱ 血清甘油三酯的测定(GPO-PAP法)149
参考文献152