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第一章 实验基本知识与基本操作1

第一节 生物化学实验室规则1

第二节 实验室安全和防护知识2

第三节 基础实验操作技能6

第四节 实验误差与提高实验准确度的方法39

第五节 实验记录与实验报告44

第二章 糖类物质的检测与分析48

实验1 糖的呈色反应和还原糖的检验48

实验2 苯酚-硫酸法测定总糖浓度50

实验3 还原糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法52

实验4 粗淀粉的测定——1％盐酸旋光法54

实验5 血糖的测定57

Ⅰ 磷钼酸比色法57

Ⅱ 蒽酮比色法59

Ⅲ 葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法（GOD-POD法）61

实验6 糖酵解中间产物的鉴定63

实验7 可溶性糖的硅胶G薄层层析65

第三章 脂类物质的检测与分析68

实验8 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法68

实验9 脂肪酸值的测定——碱滴定法69

实验10 油脂皂化与皂化值的测定72

实验11 碘价的测定（Hanus法）73

实验12 血清胆固醇的测定75

Ⅰ 化学比色法75

Ⅱ 酶法76

实验13 卵磷脂的提取与鉴定78

实验14 脂肪酸的B-氧化80

第四章 氨基酸的检测与分析83

实验15 纸层析法分离鉴定氨基酸83

实验16 甲醛滴定法测定氨基氮含量85

实验17 瓦氏呼吸仪法测定L-谷氨酸的含量87

第五章 蛋白质的分离制备与分析91

实验18 蛋白质的两性反应与等电点的测定91

实验19 蛋白质的沉淀反应、颜色反应及电荷的测定93

实验20 蛋白质含量测定（一）——微量凯氏定氮法97

实验21 蛋白质含量测定（二）101

Ⅰ 双缩脲法101

Ⅱ 考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）104

Ⅲ Folin试剂法106

Ⅳ BCA法108

Ⅴ 紫外（UV）吸收测定法109

实验22 酪蛋白的制备112

实验23 凝胶层析法分离蛋白质113

实验24 血红蛋白的凝胶过滤115

实验25 蛋白质相对分子质量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法118

实验26 血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳126

第六章 酶的分离制备与分析130

实验27 酶的特性——底物专一性130

实验28 pH值对酶活性的影响132

实验29 温度对酶活性的影响133

实验30 脲酶米氏常数的测定135

实验31 糖化型淀粉酶活性的测定138

实验32 脂肪酶活性测定140

实验33 乳酸脱氢酶活性的测定142

实验34 大麦萌发前后淀粉酶活性的测定144

实验35 发色底物测定大曲中α-1,4-葡萄糖苷酶活性147

第七章 维生素的检测分析150

实验36 维生素B1的荧光测定150

实验37 维生素B2的测定152

实验38 植物中抗坏血酸含量的测定155

实验39 维生素A的测定156

第八章 核酸的分离与分析160

实验40 哺乳动物基因组DNA的提取160

实验41 植物基因组DNA的提取162

实验42 植物总RNA的提取与电泳165

实验43 酵母RNA的分离与组分鉴定167

实验44 组织和细胞RNA的制备170

实验45 核苷酸的纸电泳172

实验46 紫外分光光度法测定核酸的含量174

实验47 RNA与DNA的测定176

实验48 DNA的琼脂糖凝胶电泳179

实验49 质粒DNA的微量制备（碱裂解法、煮沸法）182

实验50 质粒DNA的酶切鉴定及琼脂糖凝胶电泳187

实验51 质粒DNA的大量制备与纯化189

实验52 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化193

实验53 PCR基因扩增198

第九章 综合性与设计性实验200

实验54 鸡卵类黏蛋白的分离纯化200

实验55 纤维素酶活性测定及pH值对其活性的影响205

实验56 酪氨酸酶的提取及其催化活性研究208

实验57 酵母蔗糖酶的纯化及性质研究212

Ⅰ 酵母蔗糖酶的提取与纯化212

Ⅱ 蔗糖酶Km值测定及脲的抑制作用213

Ⅲ pH值对酶活性的影响和最适pH值的测定217

Ⅳ 温度对酶活性的影响和反应活化能的测定220

实验58 固定化酵母细胞及蔗糖酶活性的检测222

实验59 温度、pH值、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响224

实验60 溶菌酶结晶的制备及活性测定226

实验61 转基因农产品的PCR检测230

实验62 橘皮果胶的提取及果冻的制备235

实验63 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成236

附录 实验室中常用参数239

参考文献240