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第一篇 常用生物化学实验技术及原理1

第一章 实验的准确性1

一、单位和量1

(一)基本单位1

(二)导出单位2

(三)词头3

(四)与SI并用的单位3

(五)摩尔和浓度4

二、准确测量5

(一)误差来源5

(二)正态分布曲线8

(三)生物材料中数据的变化10

(四)容量玻璃仪器11

三、实验报告11

(一)结果的记录12

(二)表格和图解13

一、膜18

第十章 透析18

二、溶剂19

三、物理条件19

四、董南(Donnan)膜平衡20

第三章 层析法22

一、柱层析法的一般技术23

二、几种常用的层析法26

(一)吸附层析26

(二)离子交换层析27

(三)分配层析32

(四)薄层层析38

(五)凝胶层析40

(六)亲和层析46

第四章 电泳技术51

一、电泳技术基本原理52

(一)电场强度(电势梯度)53

(二)溶液的pH值54

(三)溶液的离子强度54

(四)电渗现象55

二、纸电泳56

四、琼脂凝胶电泳57

三、醋酸纤维薄膜电泳57

五、聚丙烯酰胺凝胶电泳59

第五章 分光光度法69

一、原理69

二、分光光度计的基本部件73

(一)光源73

(二)单色器74

(四)检测器75

(三)吸收池(比色杯、比色皿、比色池)75

(五)测量装置77

三、两种国产分光光度计的介绍77

(一)721型分光光度计77

(二)751G型分光光度计79

第六章 放射性同位素技术82

一、基本知识82

(一)同位素82

(二)射线的性质83

(三)放射性衰变的规律85

(四)放射性强度的单位86

二、射线的探测87

(一)盖革计数器87

(二)闪烁计数器88

三、放射自显影术89

四、放射性同位素法的优缺点90

一、组织样品91

第七章 实验样品的制备91

二、血液样品93

三、尿液样品93

第二篇 学生实验96

第八章 糖类的化学96

实验一 糖类的性质实验(一) 糖类的颜色反应96

实验一 糖类的性质实验(一) 糖类的还原作用100

实验三 总糖的测定--蒽酮比色法103

第九章 脂类的化学106

实验四 粗脂肪的提取和定量测定106

实验五 脂肪碘值的测定109

实验六 总氮量的测定--凯氏(Micro-Kjeldahl)定氮法113

第十章 蛋白质的化学113

实验七 氨基酸的分离鉴定--纸层析法122

实验八 蛋白质的性质实验(一)蛋白质及氨基酸的呈色反应125

实验九 蛋白质的性质实验(二)蛋白质的等电点测定和沉淀反应133

实验十 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳142

实验十一 酪蛋白的制备146

实验十二 甲醛滴定法测定氨基氮148

实验十三 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定152

第十一章 核酸的化学152

实验十四 菜化(花椰菜)中核酸的分离和鉴定155

实验十五 肝细胞核中核酸(RNA和DNA)的分离与测定159

实验十六 醋酸纤维薄膜电泳分离核苷酸163

实验十七 薄层层析法分离AMP、ADP和ATP165

第十二章 酶和维生素169

实验十八 酶的特性169

实验十九 枯草杆菌蛋白酶活力测定177

实验二十 底物浓度对酶促反应速度的影响--米氏常数的测定181

实验二十一 酶浓度对酶促反应速度的影响--用分光光度法测定碱性磷酸酶活性184

实验二十二 胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定188

实验二十三 维生素C的定量测定195

第十三章 新阵代谢202

实验二十四 肌糖原的酵解作用202

实验二十五 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较205

实验二十六 血糖的定量测定--GOD-PAP法209

实验二十七 发酵过程中无机磷的利用212

实验二十八 脂肪酸的β-氧化216

实验二十九 氨基移换反应(一)血液中转氨酶活力的测定(分光光度法)219

实验三十 氨基移换反应(二)谷丙转氨酶活性的鉴定(纸层析法)223

第三篇 演示实验227

实验一 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳--血清蛋白的分离227

实验二 离子交换柱层析法分离氨基酸233

实验三 凝胶过滤法测定蛋白质相对分子质量236

实验四 血红蛋白的两性解离241

实验五 紫外分光光度法测定核酸的含量243

实验六 透析实验(一) 蛋白质的透析245

实验苯 透析实验(二) 糖类的透析247

实验八 锂盐存在时蔗糖的燃烧248

实验九 用铂和血液过氧化氢酶分解过氧化氢249

实验十 吸附层析法分离叶子色素251

实验十一 小白鼠氨中毒253

实验十二 用阳离子交换树脂摄取氯化钠254

附录257

一、实验室规则257

(一)玻璃仪器的洗涤258

二、实验室基本操作258

(二)搅拌和振荡259

三、常用仪器的使用260

(一)容量玻璃仪器的使用方法260

(二)称量仪器的使用方法262

(三)分光光度计266

(四)离心机269

(五)干燥箱和恒温箱270

(六)电热恒温水浴271

(七)电冰箱271

(八)酸度计273

四、常用缓冲溶液的配制275

(一)磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液276

(二)柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1mol／L)277

(三)醋酸-醋酸钠缓冲液(0.2mol／L)278

(四)磷酸盐缓冲液278

(五)巴比妥纳-盐酸缓冲液(18°C)279

(六)Tris-盐酸缓冲液(25°C)279

(一)某些常用指示剂280

五、常用酸碱指示剂280

(七)碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1mol／L)280

(二)混合指示剂281

六、常用酸碱试剂的浓度及比重281

七、标准溶液的配制和标定282

(一)0.1mol／L氢氧化钠溶液的配制和标定282

(二)0.1mol／L标准盐酸的配制和标定283

(三)0.05mo1／L标准硫代硫酸钠溶液的制备和标定283

八、元素的相对原子质量表284

九、基础生物化学实验中学生使用仪器清单(一组)286