激光扫描共聚焦显微镜技术教程PDF|Epub|txt|kindle电子书版本网盘下载

激光扫描共聚焦显微镜技术教程PDF格式电子书版下载

注意：本站所有压缩包均有解压码： 点击下载压缩包解压工具

目录1

第一部分　激光扫描共聚焦显微镜的基本知识1

序言3

第一章　激光扫描共聚焦显微镜的基本结构、工作原理及基本功能4

一、激光扫描共聚焦显微镜的基本结构和工作原理4

（一）激光光源5

（二）扫描器9

（三）激光扫描共聚焦显微镜使用的荧光显微镜的特点和要求9

（四）计算机系统11

二、激光扫描共聚焦显微镜的基本功能12

（一）采集和处理图像12

（二）荧光分子的定性及定位13

（三）定量测定14

（四）激光扫描共聚焦显微镜可获取的图像的种类15

（五）光谱交叉干扰及其消除18

一、光的本质21

第一节　荧光光谱基础知识21

第二章　荧光探针的选择和荧光样品的制备21

二、荧光的产生22

三、荧光的淬灭23

四、激发光谱和发射光谱24

第二节　用于共焦显微镜测定的荧光样品的制备26

一、组织和细胞样品中荧光的来源26

二、荧光样品的制备要求27

（二）确定可供选择的荧光探针的范围28

（一）根据实验目的确定需要检测的指标28

三、选择荧光探针的主要步骤和方法28

（三）考察荧光探针的特性是否符合荧光样品的制备要求29

（四）考察荧光探针与所用的共聚焦显微镜系统的匹配情况30

（五）检查实验中存在的干扰情况31

四、用荧光探针标记样品的过程及注意事项31

（一）荧光标记前样品的预处理31

（二）用荧光探针标记样品32

（一）用激光扫描共聚焦显微镜在细胞原位检测核酸37

一、原位鉴定细胞或组织内生物大分子、观察细胞及亚细胞形态结构37

第三章　激光扫描共聚焦显微镜在医学及生物学研究中的应用37

（二）用激光扫描共聚焦显微镜原位检测蛋白质、抗体及其他分子40

（三）检测细胞凋亡44

（四）细胞器的观察及测定47

（五）检测细胞融合48

（六）观察细胞骨架48

（七）检测细胞间缝隙连接通讯48

（一）实时定量测定细胞内Ca2+的变化49

二、活体细胞或组织功能的实时动态监测49

（八）检测细胞内脂肪49

（二）测定细胞内pH变化50

（三）检测膜电位的变化51

（四）检测细胞内活性氧物种的产生52

（五）检测药物等跨膜进入组织或细胞过程及其定位53

（六）检测荧光共振能量转移53

（七）检测荧光漂白恢复54

第二部分　激光扫描共聚焦显微镜技术教学实验55

实验一　激光扫描共聚焦显微镜系统的结构、开关机操作及注意事项57

实验二　细胞内核酸的标记及其共焦图像采集方法60

实验三　微分干涉差显微方法获取细胞光镜图像64

实验四　荧光探针标记的鬼笔环肽染色法观察细胞肌动蛋白微丝66

实验五　动物细胞微管-微丝-细胞核的同时定位观察70

实验六　激光扫描共聚焦显微术测定单细胞凝胶电泳胶板中的“彗星”72

实验七　用激光扫描共聚焦显微镜原位检测细胞凋亡75

实验八　原位实时定量测定细胞内Ca2+浓度的动态变化80

实验九　荧光探针标记法检测活细胞中活性氧物种的变化84

实验十　活体脑片细胞内Ca2+及活性氧物种的测定87

实验十一　用共聚焦显微镜和图像分析仪测定细胞膜电位的变化91

实验十二　细胞内脂肪的检测94

实验十三　细胞间缝隙连接通讯的检测——划痕标记染料示踪技术96

实验十四　利用荧光光谱曲线分离并共定位细胞内的多种荧光蛋白99

附录1　激光扫描共聚焦显微镜需准备的器皿及要求101

附录2　多（双）光子激光扫描显微镜系统（简介）103

附录3　荧光相关光谱—激光扫描共聚焦显微镜技术（简介）107

主要参考文献109