图书介绍
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- 朱旭芬编著 著
- 出版社： 北京：高等教育出版社
- ISBN：7040183641
- 出版时间：2006
- 标注页数：212页
- 文件大小：17MB
- 文件页数：219页
- 主题词：基因－遗传工程－实验－高等学校－教材
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图书目录
目录1
实验计划表1
导论4
1 基因文库的构建18
1-1 染色体DNA的提取18
1-2 总RNA和mRNA的提取25
1-3 λ噬菌体DNA的提取33
1-4 染色体DNA的部分消化38
1-5 基因组文库的构建40
1-6 cDNA合成44
1-7 cDNA文库的构建49
2 目的基因的获得55
2-1 PCR扩增及RT-PCR55
2-2 核酸电泳64
2-3 核酸探针的标记及检测69
2-4 核酸探针筛选基因文库77
3 载体质粒的制备82
3-1 质粒DNA的提取与纯化82
3 2 核酸纯度、浓度与相对分子质量的测定90
4 扩增质粒的构建94
4-1 限制性内切酶的酶切反应94
4-2 凝胶电泳法进行DNA的分离、提纯100
4-3 DNA片段的体外连接103
5 重组DNA导入宿主细胞107
5-1 感受态细胞的制备107
5-2 重组质粒的转化111
6-1 阳性克隆的筛选117
6 重组子的筛选与鉴定117
6-2 测序与序列同源性分析122
6-3 Southern印迹127
7 表达质粒的构建与诱导表达134
7-1 表达质粒的构建134
7-2 Northern印迹140
7-3 外源基因的诱导表达145
7-4 SDS-PAGE149
7-5 Western印迹155
7-6 酶联免疫吸附测定（ELISA）160
7-7 蛋白质生物功能测定法162
8 工程菌的培养与目标产物分离164
8-1 发酵条件的优化164
8-2 诱导表达蛋白质的分离沉淀166
8-3 凝胶过滤层析172
8-4 离子交换层析180
8-5 蛋白质浓度的测定186
8-6 酶活性的测定189
8-7 分离纯化蛋白的收率计算与保存191
参考文献193
附录1 简写194
附录2 实验注意事项197
附录3 如何撰写实验报告199
附录4 常用的碱基、氨基酸符号及缓冲液201
附录5 大肠杆菌基因型204
附录6 培养基与试剂的配制205
附录7 实验仪器212