图书介绍
大豆在暗诱导下光周期及衰老相关基因的差异表达研究PDF|Epub|txt|kindle电子书版本网盘下载
- 赵琳著 著
- 出版社： 北京：中国农业科学技术出版社
- ISBN：9787802338692
- 出版时间：2009
- 标注页数：182页
- 文件大小：60MB
- 文件页数：196页
- 主题词：大豆－光诱－光周期－研究；大豆－衰老－基因－研究
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图书目录
1 引言1
1.1 植物开花机理的研究进展3
1.1.1 植物花芽分化过程的调节机制4
1.1.2 环境条件对植物成花的调控6
1.2 大豆光周期现象的研究进展19
1.2.1 大豆生育期性状的光周期反应特性19
1.2.2 光周期对大豆农艺性状和籽粒品质的影响22
1.2.3 大豆中光敏感性E等位基因的研究进展23
1.2.4 大豆开花时间基因图谱的绘制24
1.3 拟南芥开花诱导的分子生物学研究进展27
1.3.1 周期途径28
1.3.2 春化促进途径33
1.3.3 自主途径34
1.3.4 赤霉素途径35
1.3.5 染色质结构和开花抑制36
1.3.6 拟南芥开花途径的整合37
1.3.7 植物中的拟南芥开花途径的基因保守性39
1.4 植物衰老的研究44
1.4.1 衰老的生理生化反应特性44
1.4.2 衰老学说46
1.4.3 衰老的调控49
1.5 RAV转录因子的研究进展52
1.6 基因差异表达的研究方法53
1.6.1 基于cDNA的PCR扩增方法54
1.6.2 基于差减杂交的克隆方法56
1.6.3 表达序列标签61
1.6.4 基因表达系列分析61
1.6.5 微阵列杂交62
1.6.6 实时荧光定量PCR技术64
1.7 植物遗传转化65
1.7.1 植物遗传转化方法65
1.8 研究目的和意义69
2 材料和方法73
2.1 实验材料和试剂75
2.1.1 植物材料75
2.1.2 菌种及载体75
2.1.3 主要试剂75
2.2 实验方法76
2.2.1 抑制性消减杂交（SSH）76
2.2.2 抑制消减文库的构建84
2.2.3 反向Northern blot斑点杂交筛选消减文库87
2.2.4 测序及序列同源性检索89
2.2.5 实时荧光定量PCR进一步验证差异表达的片段90
2.2.6 RACE方法克隆大豆GmRAV基因92
2.2.7 Real-time RT-PCR分析GmRAV的表达96
2.2.8 植物表达载体pBl121-GmRAV的构建97
2.2.9 农杆菌介导法转化烟草叶盘101
2.2.10 转基因烟草的分子生物学检测103
2.2.11 转GmRAV基因烟草T2代功能分析106
3 结果与分析109
3.1 抑制性消减杂交（SSH）111
3.1.1 大豆总RNA的提取111
3.1.2 SMART技术合成cDNA111
3.1.3 双链cDNA的Rsal酶切结果112
3.1.4 正向差减产物的PCR扩增结果113
3.1.5 反向Northern斑点杂交筛选结果114
3.1.6 测序与同源性检索结果116
3.1.7 候选cDNA片段差异表达检测分析结果116
3.1.8 基因功能相关分析117
3.2 大豆GmRAV基因克隆122
3.2.1 大豆GmRAV基因5'RACE和3'RACE克隆122
3.2.2 大豆GmRAV基因全长序列的生物信息学及系统进化分析123
3.2.3 GmRAV全长基因组DNA序列的获得127
3.3 大豆GmRAV基因表达研究128
3.3.1 大豆叶片中GmRAV基因在LD和SD条件下基因表达128
3.3.2 大豆GmRAV基因在LD和SD条件下组织特异性表达分析128
3.3.3 激素对大豆叶片中GmRAV基因的表达影响130
3.4 植物表达载体pBI121-GmRAV的构建130
3.5 烟草的遗传转化133
3.5.1 丛生芽和根的诱导133
3.5.2 转基因烟草的PCR检测133
3.5.3 转基因烟草的PCR-Southern检测134
3.5.4 转基因烟草的Northern blot检测136
3.5.5 长日照和短日照下转基因烟草的T2代表型观察136
3.5.6 转GmRAV基因烟草植株矮化与BR和GA激素有关137
3.5.7 过量表达GmRAV增强了ABA促进叶片衰老的效应139
3.5.8 暗处理下GmRAV过量表达加速植株的衰老140
4 讨论141
4.1 光周期和衰老相关基因表达谱分析143
4.2 光周期和衰老相关基因的克隆146
4.3 植物表达载体的构建及烟草的遗传转化148
4.3.1 采用农杆菌转化植物的优势149
4.3.2 转化农杆菌及其鉴定149
4.3.3 用于转化的农杆菌的培养149
4.3.4 叶盘法转化烟草150
5 结论153
参考文献158
附录176
攻读学位期间发表的学术论文180
图版181